蛋白水解物因可以提高各種生物制藥生產(chǎn)系統的整體性能而常被用于生產(chǎn)工藝中，比如改善細胞活力、提高細胞增殖和目的蛋白產(chǎn)量、提高病毒培養滴度等等。然而，在一個(gè)限定系統中，可能難以同時(shí)觀(guān)察到這些作用，因為每種細胞培養平臺都是獨一無(wú)二的，作為培養基添加物的蛋白水解物也是如此。每種水解物對細胞的生長(cháng)和生產(chǎn)力都具有不同的作用并會(huì )受到多種因素的影響，如細胞系、生產(chǎn)水解物的原材料、生產(chǎn)工藝、水解物用量以及基礎培養基的成分等等。

為了滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，西美杰代理的KERRY品牌從上世紀以來(lái)，充分利用在細胞培養基添加物領(lǐng)域中先進(jìn)的技術(shù)與專(zhuān)業(yè)積累，開(kāi)發(fā)出了一系列非動(dòng)物源復合添加物系統，大大提升了各類(lèi)細胞系的性能，能有效降低生產(chǎn)成本、簡(jiǎn)化篩選工藝，滿(mǎn)足了生物制品領(lǐng)域客戶(hù)的生產(chǎn)和監管要求。

KERRY非動(dòng)物源復合添加物系統優(yōu)勢特點(diǎn)：

• 功能更加強大——集合了KERRY傳統產(chǎn)品中植物蛋白水解物和成分明確添加物二者在培養效果上的優(yōu)點(diǎn)；
• 產(chǎn)品線(xiàn)更加合理——根據客戶(hù)對下游純化要求的不同，分別開(kāi)發(fā)出了含有生長(cháng)因子的增強版和對下游純化無(wú)影響的無(wú)蛋白版本；
• 針對性更強——對于CHO細胞、雜交瘤細胞、禽類(lèi)細胞、昆蟲(chóng)細胞以及常用于疫苗生產(chǎn)的各類(lèi)細胞系都有專(zhuān)門(mén)對應的復合添加物產(chǎn)品。

本文中小編將重點(diǎn)為大家介紹常用于疫苗研發(fā)和生產(chǎn)的Sheff-Vax系列復合添加物。

1. Sheff-Vax復合添加物介紹

Sheff-Vax復合添加物是一類(lèi)成分復雜、不含動(dòng)物源成分（ACF）的培養基添加物系統，根據是否不含蛋白（PF）、添加微量元素（Plus）等各類(lèi)主要成分的差異，分為以下五個(gè)產(chǎn)品（見(jiàn)下表）。Sheff-Vax作為細胞培養基的添加成分，能部分或完全替代血清，為多種類(lèi)型細胞（如BHK、Vero、SF-9、MDCK、MRC5等）提供生長(cháng)和生產(chǎn)所需的各類(lèi)營(yíng)養，包括氨基酸、多肽、碳水化合物、維生素、微量元素等，不僅能顯著(zhù)提升細胞生長(cháng)狀態(tài)，還能提高病毒產(chǎn)量，因而常常被用于病毒疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)。Sheff-Vax系列添加物已經(jīng)在多個(gè)上市疫苗生產(chǎn)工藝中被添加和使用，如口蹄疫疫苗、戊肝疫苗、流感疫苗等，也是全球多家細胞培養基生產(chǎn)商的常用原料之一。

*注：ACF - Animal Component Free不含動(dòng)物源成分；PF - Protein Free不含蛋白質(zhì)；Plus – 含有微量元素。

2. 如何選擇和使用Sheff-Vax添加物

在實(shí)際應用中發(fā)現，上述五種Sheff-Vax添加物對不同類(lèi)型細胞系的適用性表現也有一定差異，我們可以根據下表來(lái)選擇和測試合適的Sheff-Vax添加物。對于使用商品化無(wú)血清培養基和其他培養基的客戶(hù)，Sheff-Vax添加物系統也可以用來(lái)優(yōu)化培養基，提高細胞生產(chǎn)效率和促進(jìn)細胞增長(cháng)。這種情況下無(wú)需馴化細胞，Sheff-Vax可直接添加到無(wú)血清培養基中。Sheff-Vax添加物的高活性和穩定性，使其可以應用于大多數商業(yè)培養基。 

*注：● 有效；★ 更加有效。

Sheff-Vax添加物的配置方法

 
   使用Sheff-Vax添加物替代血清的培養過(guò)程中，需要先進(jìn)行細胞馴化，逐代降低血清濃度，同時(shí)增加Sheff-Vax添加物濃度，進(jìn)而實(shí)現降低或完全去除血清和其他動(dòng)物源成分的培養方案，如下表所示。

*注：對照培養基：基礎培養基+10% FBS； 馴化培養基：基礎培養基+Sheff-Vax添加物。

3. Sheff-Vax添加物應用案例

       1）使用Sheff-Vax Plus PF ACF對BHK細胞的降血清馴化案例

BHK細胞降血清培養生長(cháng)曲線(xiàn)對比

   該馴化培養過(guò)程添加了Sheff-Vax Plus PF ACF來(lái)降低BHK 培養基中FBS的使用量，把FBS濃度從10%降低到0.5%依然可以保持很好的細胞生長(cháng)狀態(tài)。（注：在整個(gè)馴化傳代過(guò)程中，培養基需要添加0.5%的PluronicF-68來(lái)防止細胞凝聚成團。）

         2）使用Sheff-Vax ACF對Vero細胞的無(wú)血清馴化案例

使用Sheff-Vax添加物可以實(shí)現Vero細胞的無(wú)血清培養，在逐步減少血清用量直至完全去除血清后，Vero細胞生長(cháng)形態(tài)無(wú)顯著(zhù)變化（見(jiàn)下圖）。

Vero細胞生長(cháng)形態(tài)對比

（A）對照組：DMEM+10%胎牛血清；

（B）實(shí)驗組：DMEM+0%胎牛血清+2g/L Sheff-Vax ACF+10mg/L rInsulin。

每次傳代逐步減少FBS，同時(shí)添加Sheff-Vax ACF，在相同培養時(shí)間內，無(wú)血清組細胞生長(cháng)密度可達到10% FBS組細胞密度峰值的一半，延長(cháng)培養時(shí)間還可以獲得更高的細胞密度（見(jiàn)下圖）。

Vero細胞生長(cháng)曲線(xiàn)對比

(i) 10% FBS, (ii) 7.5% FBS, (iii) 5% FBS,(iv) 2.5% FBS, (v) 1.5% FBS, (vi) 1% FBS, (vii) 0.5% FBS, (viii) 0.25% FBS, (ix) 0.1% FBS, (x) 0% FBS

3）添加Sheff-Vax可以獲得更高的病毒滴度

分別在培養狂犬病毒和麻疹病毒的細胞培養基中添加不同的Sheff-Vax產(chǎn)品，與對照組相比均能有效提升病毒生產(chǎn)滴度。在病毒增殖階段添加Sheff-Vax Plus PF ACF VP對病毒滴度也有顯著(zhù)的提升（見(jiàn)下圖）。

添加Sheff-Vax培養的病毒滴度對比

  綜上所述，Sheff-Vax復合添加物在疫苗研發(fā)生產(chǎn)過(guò)程中具有非常多的優(yōu)勢，主要表現為：

• Sheff-Vax是一系列非常適用于細胞疫苗生產(chǎn)的非動(dòng)物源添加物；
• Sheff-Vax具有可靠的批間一致性；
• Sheff-Vax能發(fā)揮出與血清相同的生物學(xué)功能；
• Sheff-Vax能有效提升病毒疫苗的生產(chǎn)效率；
• Sheff-Vax的高性?xún)r(jià)比能顯著(zhù)降低生產(chǎn)成本。

北京西美杰科技有限公司是KERRY品牌的中國區總代理，如果您對上述產(chǎn)品感興趣，歡迎撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄www.mkwy-ic.com獲取更多產(chǎn)品資料和申請測試樣品。