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4.為什么培養基的顏色不一樣?有時(shí)候白色有時(shí)候是黃色?黃色可以正常使用嗎?
9.Phytotech赤霉素有GA3,GA4+GA7混合物2種形式,有無(wú)GA4和GA7單獨組分產(chǎn)品?
10.Phytotech的玉米素及玉米素核苷均為反式,有無(wú)順式的產(chǎn)品可以提供?
11.培養基配制調節pH值以后出現沉淀,是否正常?會(huì )影響植株生長(cháng)嗎?
16. Sigma的Phytagel(P8169)我們有無(wú)替代產(chǎn)品?有何差別?
18、培養一種特殊的植物物種,想知道使用什么培養基比較合適,有推薦嗎?
19. 培養基不凝固問(wèn)題,比如此前一直凝固的很好,偶爾會(huì )出現不凝固現象
20、玉米素與玉米素核苷的關(guān)系,使用上是否可以替換,替換濃度如何計算?
22、客戶(hù)使用不同硬度的凝膠類(lèi)/瓊脂類(lèi)產(chǎn)品,例如從A111改成A296,會(huì )對培養苗有影響嗎?
23、BR溶解在酒精里之后,放置一段時(shí)間會(huì )析出是什么原因?
25. 結冷膠導致擬南芥根毛生長(cháng)問(wèn)題,根生長(cháng)受阻,但根毛變的很多?
26、Phytotech包含潮霉素B在內的抗生素能否用于哺乳動(dòng)物細胞培養?
27、C187和C195的椰子粉和椰子汁來(lái)源于新鮮椰子還是老椰子?
28、T390、D295、K750、A104、T869、Z899的滅菌方式?
1.常賣(mài)的培養基都有哪些?
Phytotech的培養基有很多品種,適合各類(lèi)植物培養,主要有MS,B5,N6,WPM,LS等等,還有蘭科、煙草、胡蘿卜、玫瑰等特殊植物的專(zhuān)用培養基。
2. 培養基的組分是什么樣的?
Phytotech的粉末培養基多數是大量元素、微量元素、部分含維生素, 不含蔗糖、植物凝膠和植物生長(cháng)調節劑,不過(guò)部分MS改良培養基是含的,具體參見(jiàn)產(chǎn)品宣傳單頁(yè)或者網(wǎng)站介紹。
3.培養基如何保存?
4.為什么培養基的顏色不一樣?有時(shí)候白色有時(shí)候是黃色?黃色可以正常使用嗎?
正常培養基是白色偏黃,有的時(shí)候顏色比較深是因為培養基中的鐵鹽(尤其是螯合鐵)容易吸潮引起顏色變化,但是這個(gè)不會(huì )影響培養基的質(zhì)量,也不會(huì )影響植株的生長(cháng)。
Yes. If this powder is still free-flowing it is fine for use. Many of our media are hygroscopic in nature. This means that when the powder is exposed to air, it absorbs water. This causes the powder to change from a white color to yellow. This reaction can also occur over time as the powder ages. It is advised that the container of media not be left open for extended periods of time when weighing, due to the hygroscopic nature of some of our products.
There are two things to look for when determining whether the media is no longer advisable for use:
- If the powder has absorbed enough water to form clumps that do not easily break apart with pressure, and the powder is no longer free-flowing, then it is advisable to dispose of it. Some clumps in the media are alright, as long as they can still be easily broken apart.
- If the powder does not fully go into solution, and causes a hazy appearance, this could be a sign that the powder is no longer fit for use. However, some of our media have a naturally hazy or slightly hazy appearance, due either to the inclusion of agar, or plant growth regulators that will not go into solution until heated/autoclaved. Please check our COA online to see if a slightly hazy, or hazy appearance is normal for your product if you ever have any doubts about what the solution appearance for this product should be.
二者都需要
常賣(mài)的是50L和100L的規格(一般不提供10L包裝),一般是以粉末形式提供,每升稱(chēng)取粉末重量見(jiàn)瓶身說(shuō)明。
僅部分植物凝膠提供試用裝,試用裝申請聯(lián)系我司銷(xiāo)售人員。
8.Phytotech是否能為客戶(hù)定制特殊培養基?
可以提供這樣的服務(wù),但是對客戶(hù)定制的量有要求,需要量在 100*100L以上,客戶(hù)提供配方后我司協(xié)助咨詢(xún)廠(chǎng)家,承諾配方保密性。
9.Phytotech赤霉素有GA3,GA4+GA7混合物2種形式,有無(wú)GA4和GA7單獨組分產(chǎn)品?
沒(méi)有。
10.Phytotech的玉米素及玉米素核苷均為反式,有無(wú)順式的產(chǎn)品可以提供?
玉米素及玉米素核苷分為反式和順式2種形式,起調節作用的主要是反式形式,順式形式的調節作用很不明顯,所以一般都使用的是反式形式的玉米素及玉米素核苷。目前只有Sigma有順式玉米素,價(jià)格比較高,Phytotech一般不提供順式的產(chǎn)品,如果用量比較大(如1g)可以考慮訂制。
11.培養基配制調節pH值以后出現沉淀,是否正常?會(huì )影響植株生長(cháng)嗎?
一般培養基配制后需要將ph值調節到植株生長(cháng)最佳值,常用NaOH或者KOH,廠(chǎng)家驗證沉淀不會(huì )影響植株生長(cháng),如果想要消除沉淀,建議采用KOH重新調節。如果使用有沉淀的培養基影響了植株的生長(cháng),請客戶(hù)提供圖片及相關(guān)產(chǎn)品使用信息,我司跟廠(chǎng)家反饋,進(jìn)行產(chǎn)品投訴。
12.產(chǎn)品一般保質(zhì)期是多久?
一般粉末培養基有效期為3-4年時(shí)間,其他粉末產(chǎn)品為2年以上,液體產(chǎn)品為1年以上,具體時(shí)間根據產(chǎn)品包裝外的批號到官方網(wǎng)站查詢(xún)COA核對產(chǎn)品出廠(chǎng)的檢測信息。
Phytotech生化試劑純度沒(méi)有統一規格,具體純度需要查看產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)或者COA。
14.培養基1000X維生素儲存液出現沉淀,是否正常?
出現沉淀的原因是因為里面含有100 g/L的肌醇,在常溫下容易析出,另外1000X濃度比較高,低溫情況下溶解度降低,容易飽和析出;
解決辦法1:可以將產(chǎn)品放在37度水浴10-15分鐘,間隔搖晃,沉淀就會(huì )消失,此方法不會(huì )影響產(chǎn)品的質(zhì)量和對植物生長(cháng)的影響;
解決辦法2:將1000X儲存液稀釋成100X溶液,分裝保存。
15.我們的產(chǎn)品都是無(wú)菌的嗎?
粉末培養基在開(kāi)封前是保證無(wú)菌的,但是在使用時(shí)建議再次滅菌,因為在配制液體培養基時(shí),容易染菌;維生素溶液、植物生長(cháng)調節劑溶液、液體培養基(儲存液)、鹽溶液、部分緩沖液都是經(jīng)過(guò)過(guò)濾滅菌的,在保證不染菌的情況下,可以不用再次滅菌。抗生素溶液產(chǎn)品,除用DMSO溶解的產(chǎn)品以外,都是經(jīng)過(guò)過(guò)濾滅菌的,但是大部分抗生素溶液產(chǎn)品是干冰運輸,目前沒(méi)辦法進(jìn)口,有部分是藍冰運輸,可以進(jìn)口,但是可能需要加運費,具體請咨詢(xún)我司客服。
16. Sigma的Phytagel(P8169)有無(wú)替代產(chǎn)品?有何差別?
Phytagel的本質(zhì)就是結冷膠,我們的結冷膠有G434和G3251,根據廠(chǎng)家提供的信息,Phytotech品牌的G434、G3251和Sigma 品牌P8169產(chǎn)品性質(zhì)是一樣的,使用也相同。而G3251是G434的升級產(chǎn)品(原料供應更好),所以?xún)r(jià)格更高一些。
注意:G434與氨基酸糖苷類(lèi)抗生素(特別是卡那霉素和潮霉素B)一起使用對植物生長(cháng)有影響。如遇此類(lèi)情況,建議降低抗生素的使用濃度。同時(shí)建議嘗試用G434替換P8169時(shí)注意抗生素使用情況。
17、結冷膠使用注意事項
結冷膠的溶解要求比較特殊,一是溫度,結冷膠不溶于冷水,一定要是加入熱水攪拌溶解;二是培養基中二價(jià)陽(yáng)離子濃度是結冷膠凝固的關(guān)鍵,一般是Mg2+,和Ca2+這2種離子的總濃度在4-10mM適中,而且2種離子的濃度最好都不要低于1.5mM,低于或者過(guò)高都會(huì )影響凝膠效果,一般來(lái)說(shuō)MS培養基中二價(jià)離子濃度是足夠的,1/2MS培養基用結冷膠也可以凝固的很好,有部分客戶(hù)使用的其他類(lèi)型的培養基會(huì )低于普通MS,甚至比1/2MS更低,如果二價(jià)陽(yáng)離子總濃度過(guò)低影響了凝膠效果,則需要補充足夠二價(jià)陽(yáng)離子,如果由于培養基類(lèi)型或者元素含量限制,則不適合使用結冷膠類(lèi)的凝膠產(chǎn)品,建議更換瓊脂或者卡拉膠,目前確定不適合用結冷膠的培養基有DKW,SH,LS。三是pH值,結冷膠凝固最適合ph值為5.8,一般高溫滅菌影響不大,但不排除因為高壓條件變化導致ph值變化影響的凝膠效果。
18、培養一種特殊的植物物種,想知道使用什么培養基比較合適,有推薦嗎?
我們培養基產(chǎn)品有一些是專(zhuān)門(mén)適用特殊物種,還有一些能適應多種植物。如果客戶(hù)能給詳細描述植物的情況,我們可以推薦一些培養基,但不能夠提供許多植物的實(shí)驗操作,尤其是一些稀有的植物。對一些物種我們可以提供一些相關(guān)技術(shù)論文輔助客戶(hù)選擇植物培養基。
19. 培養基不凝固問(wèn)題,比如此前一直凝固的很好,偶爾會(huì )出現不凝固現象
植物凝膠尤其是瓊脂不凝固是與ph值有關(guān)系,ph過(guò)低導致的。出現此類(lèi)情況是因為調節ph值的操作問(wèn)題,很多客戶(hù)都先調節了ph值,然后再加入了植物凝膠,這個(gè)過(guò)程中ph值可能會(huì )降低到5.2,才會(huì )不凝固。解決辦法:加入瓊脂粉后調節ph值,熱可逆過(guò)程ph值會(huì )恢復到5.8,瓊脂凝固不會(huì )出現問(wèn)題。
It is very important that your customer adjust the pH after every component is added to the medium. If they adjusted it before they added their homemade agar, their agar could have lowered the pH below 5.2 causing it not to gel. This is a very common problem, where customers think they cannot adjust the pH after they add the agar because the agar isn’t dissolved.
Though pH can change with temperature, this is a thermodynamically reversible process, so upon cooling the pH will return to the original pH. Once dissolved, if your customer is preparing their media correctly, we should have the same components in solution. The only difference should be the pH.
20、玉米素與玉米素核苷的關(guān)系,使用上是否可以替換,替換濃度如何計算?
目前2者之間的關(guān)系暫時(shí)沒(méi)有非常完整明確的定論,但基本能確定的是玉米素核苷是細胞分裂素的轉運形式,并不是玉米素的活性形式,參考文獻:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5296302/,https://link.springer.com/article/10.1007/BF00390846.
玉米素價(jià)格要比玉米素核苷優(yōu)惠。所以,如果考慮成本,打算將玉米素核苷替換成玉米素,建議按照等摩爾分子量來(lái)替換。具體如下:2 mg/L的 Z899添加量換算為Z125 的添加量是1.25 mg/L。所以使用玉米素的成本,不僅僅是售價(jià)可以降低,從使用量來(lái)看也是降低的。
21、瓊脂選購注意事項
瓊脂是藻類(lèi)提取加工所得,而原材料受生長(cháng)環(huán)境,氣候等各方面影響變化差異較明顯,從而會(huì )導致各生產(chǎn)廠(chǎng)家的產(chǎn)品批間差異。主要變化在于凝膠強度,顏色,離子濃度等差異,這個(gè)問(wèn)題一直是瓊脂供應商中普遍存在且不可克服的問(wèn)題,尤其在近年來(lái)原材料異常緊缺的情況下容易突顯,即使是同一片產(chǎn)地,當時(shí)的溫度和環(huán)境的變化都會(huì )影響到原材料的性質(zhì),造成所提取瓊脂的質(zhì)量的變化,難以保證批間差穩定,這是瓊脂這類(lèi)產(chǎn)品的特殊性質(zhì),不是能夠通過(guò)生產(chǎn)工藝和技術(shù)加以改善的。所以,當客戶(hù)選購不同批次的瓊脂粉的時(shí)候,一定要特殊注意批次之間的強度變化,如果和之前所選用的產(chǎn)品的強度一致,那么可以按照之前的用量使用,如果強度不一致,建議做凝固實(shí)驗,尋找最合適的培養基瓊脂濃度,從而保證實(shí)驗的順利穩定。
簡(jiǎn)易測試條件:
濃度 |
50ml測試體系 |
4 g/L |
0.2g |
5 g/L |
0.25g |
6 g/L |
0.3g |
7 g/L |
0.35g |
8 g/L |
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22、客戶(hù)使用不同硬度的凝膠類(lèi)/瓊脂類(lèi)產(chǎn)品,例如從A111改成A296,會(huì )對培養苗有影響嗎?
23、BR溶解在酒精里之后,放置一段時(shí)間會(huì )析出是什么原因?
酒精揮發(fā),溶劑減少,溶質(zhì)析出
請查看說(shuō)明書(shū),如果說(shuō)明書(shū)中未明確提出請聯(lián)系我司客服咨詢(xún)廠(chǎng)家。
25. 結冷膠導致擬南芥根毛生長(cháng)問(wèn)題,根生長(cháng)受阻,但根毛變的很多
原因:結冷膠強度會(huì )影響根毛生長(cháng),批件差的凝膠強度不同,需要根據凝膠強度調整使用濃度即可。
It is known that gellan gum concentration can affect root growth. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3967087/
As Gelzan is a product of microbial fermentation, there will be lot-to-lot variability. We report the gel strength of each lot of Gelzan on our CoA’s (see attached). Your customers previous lot 14M3251043 had a gel strength of 439 g/cm2. This lot 15L3251051 has a gel strength of 523 g/cm2. When used at the same concentration, an increase gel strength is the same as an increase in concentration.
Many of our customers who have seen gel strength variation affect plant growth will use the following formula:
Where X is the Gelzan concentration (e.g. g/L, %) that produced optimal growth at 439 g/cm2, and Y is the Gelzan concentration to use with the lot that had a 523 g/cm2 gel strength but have the same apparent gel strength as the original results with X g/L of Gelzan than was 439 g/cm2
26、Phytotech包含潮霉素B在內的抗生素能否用于哺乳動(dòng)物細胞培養?
不可以。
27、C187和C195的椰子粉和椰子汁來(lái)源于新鮮椰子還是老椰子?
均來(lái)源于新鮮椰子。
28、T390、D295、K750、A104、T869、Z899的滅菌方式?
T390、D295和K750高壓滅菌;A104和T869過(guò)濾除菌;Z899建議過(guò)濾除菌
Z899, the “active” part of this compound, trans-Zeatin (Prod. No. Z125) is autoclavable. I would assume the ribosyl linkage is autoclave stable, but to be safe, we would recommend filter-sterilizing.
29、植物凝膠高壓滅菌后不凝固的常見(jiàn)原因?
PH值太低(低于5.2),通常情況下瓊脂在低PH值下不會(huì )凝固;高壓時(shí)間過(guò)長(cháng)或溫度/壓力過(guò)高,瓊脂分子之間的鍵會(huì )斷裂;鈣的含量過(guò)高,Quoirin&Lepoivre Basal Salts and DKW等培養基中含鈣量高,會(huì )抑制結冷膠的凝固。